백서 두개관세포에서 Ipriflavone이 골조직 개조에 미치는 영향

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백서 두개관세포에서 Ipriflavone이 골조직 개조에 미치는 영향
Effects of lpriflavone on bone remodeling in the rat calvarial cell

Korean Journal of Orthodontics 2005년 35권 4호 p.275 ~ 285

소속 상세정보

이용승 김영준/이기헌/황현식

KMID : 0361920050350040275

Abstract

본 연구는 ipriflavone (isopropoxyisoflavone)의 투여가 백서 두개관세포의 증식과 골조직 개조에 미치는 영향을 알아보고자 시도되었다. 태령 20-21일째의 백서 두개관세포를 분리 배양한 후, 10^(-9) M부터 10^(-5) M까지 농도의 ipriflavone을 투여하고 1일째와 3일째에 MTT 분석을 시행하여 흡광도를 평가한 결과, 모든 농도에서 백서 두개관세포의 증식을 보이지 않았다. 한편 골조직 개조에 미치는 영향을 알아보기 위하여 14일째에 alizarin red염색을 시행하여, 형성된 석회화 결절 면적을 측정하였을 때, 10^(-8) M, 10^(-7) M, 10^(-6) M 농도를 투여한 경우 석회화 결절 형성이 유의하게 증가하였다. 골아세포의 분화에 미치는 영향을 알아보기 위하여 ipriflavone을 투여하고 7일째와 14일째에 추출한 RNA를 역전사 중합효소 연쇄반응(RT-PCR)을 시켜 bone sialoprotein (BSP), type 1 collagen (COL I), osteocalcin (OCN) 유전자 발현을 관찰한 결과 BSP와 COL I 유전자는 배양 7일째 높은 발현을 보였고, OCN 유전자는 배양 14일째 높은 발현을 보였다. 이상의 연구결과 ipriflavone이 백서 두개관세포에서 석회화를 촉진시키고 골아세포의 분화에 관여하는 BSP, COL I 및 OCN 유전자 발현을 증가시켜 골조직의 개조를 빠르게 할 수 있음을 시사하였다.

lpriflavone (isoprofoxyisoflavone), a synthetic derivative from soy isoflavone diazein, has been shown to inhibit bone resorption and perhaps stimulate bone formation. This study was performed to examine the effects of ipriflavone on the proliferation and bone remodeling in rat calvarial cells in vitro. The rat calvarial cells were isolated from fetus aged 20 to 21 days and cultured in BGJb media. The graded concentration of ipriflavone (10^(-9)-10^(-5) M) was administered into cultured cells. When the cell proliferation was estimated through the measurement of MTT assay, there was no increase in cellular proliferation of the rat calvarial cell at any ipriflavone concentration. The cellular activity was evaluated through the formation of mineralized nodules stained by alizarin red. The formation of mineralized nodules significantly increased at concentrations of 10^(-8) M, 10^(-7) M and 10^(-6) M ipriflavone. Reverse transcription-polymerase chain reaction analyses (RT-PCR) were done at 7 and 14 days after culture to detect the expression of Bone Sialoprotein (BSP), Type I collagen (COL I) and Osteocalcin (OCN). As a result, the expressions of BSP and COL I increased of the 7th day of culture and the expression of OCN increased on the 14th day of culture. These results indicate that ipriflavone facilitates the bone remodeling process by promoting rat calvarial cell differentiation and stimulating mineralization through increased expression of extracellular matrix genes, such as BSP, COL I and OCN.